بررسی گلیکوزیلاسیون آنتی ژن (apical membrane antigen) ama1 در پلاسمودیوم فالسیپاروم
پایان نامه
- وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه پیام نور - دانشگاه پیام نور استان تهران - دانشکده علوم پایه
- نویسنده میترا خلیلی
- استاد راهنما زهرا زمانی محمد ارجمند
- تعداد صفحات: ۱۵ صفحه ی اول
- سال انتشار 1391
چکیده
یک فرآیند مهم در چرخه زندگی پلاسمودیوم فالسیپاروم تهاجم به گلبولهای قرمز انسان است. ورود به سلولهای میزبان نیازمند آنتی ژن ama1 می باشد. بدلیل اینکه در یوکاریتوها آنتی بادیهایی که بر علیه این آنتی ژن ایجاد می شود می تواند مانع تهاجم شود بنابراین ama1 یکی از اهداف اولیه در تولید واکسن به شمار می رود. گفته می شود گلیکوزیلاسیون پروتئینهای سطحی در بسیاری از اعمال سلولی نظیر شناسایی سلولها سیگنالینگ و خاصیت آنتی ژنی نقش دارد. عقیده بر این است که کربوهیدراتهای موجود در سطح انگل مالاریا توسط سیستم ایمنی میزبان شناسایی می شوند. در این پژوهش تصمیم بر تلخیص آنتی ژن ama1 از انگل پلاسمودیوم فالسیپاروم گرفته شد. برای اینکار از روش استفاده شده متدوال (tragger and jonson) و روش دوم که روش تغییر یافته از متد (raadfar) بود با این روش درصد پارازیتمی 80% افزایش یافت. نمونه های انگل با استفاده از بافر مخصوص اولتراسانتریفیوژ شده و آنتی ژنها جدا شدند و سپس برای انجام sds page مورد استفاده قرار گرفتند و سپس با استفاده از روش الکتروالیوشن تلخیص و با استفاده از لوله های مخصوص تغلیظ شدند پس از این مراحل و انجام sds page با استفاده از رنگ آمیزی نیترات نقره مورد بررسی قرار گرفتند. پس از آن ایمونوبلاتینگ انجام گرفت و جهت بررسی گلیکوزیلاسیون آنتی ژن مورد نظر از کیت q proteome oglycan glycol protein kit qproteome total glycoprotein kit استفاده شد. در نتیجه این بررسیها از آنتی ژن تلخیص شده پس از انجام sds page و رنگ آمیزی نیترات نقره در موقعیت 83kda یک باند حاصل شد. همچنین پس از انجام بلاتینگ نیز یک باند منفرد در محل kda 83 حاصل آمد در بررسیهایی که با کیت به عمل آمد نیز هر دو نوع گلیکوپروتئین نوع n و o بدست آمد در نهایت برای مقایسه با انواع طبیعی این آنتی ژن با نوع نو ترکیب و سنتیک آن به بررسی آماری پرداخته شد که نتایج حاصل عدم وجود سایتهای گلیکوزیلاسیون مناسب بر روی نمونه های نو ترکیب را اثبات نمود
منابع مشابه
آنالیز توالی و ساختار ژن apical membrane antigen-1)ama-1)آنتی ژن کاندید واکسن مالاریا در ایزوله های پلاسمودیوم فالسیپاروم ایرانی
مالاریا یکی از مسائل مهم بهداشتی در کشورهای گرمسیری و نیمه گرمسیری جهان است. گسترش سویه هایی از انگل که نسبت به درمان با داروهای ضد مالاریایی مقاوم هستند، بر نیاز فوری برای استفاده از واکسن مالاریا، به عنوان ابزاری برای پیشگیری و کنترل بیماری، تأکید می کند. آنتی ژن رأس غشایی- 1 (ama-1) پلاسمودیوم فالسیپاروم یکی از مهم ترین کاندیدهای واکسن مرحله خونی مالاریا است که تحت بررسی می باشد، اما تغییرات...
بررسی گلیکوزیلاسیون آنتی ژن c-terminal msp1 (c-terminal merozoite surface protein) در پلاسمودیوم فالسیپاروم
مالاریا یکی از بیماری های مهم انگلی در کشورهای گرمسیری دنیا است. پلاسمودیوم فالسیپاروم انگل تک یاخته ای است که تب سه یک بدخیم را ایجاد می کند. آنتی ژن های پلاسمودیوم فالسیپاروم در سطح انگل یا در سطح سلول های آلوده ،کاندیداهای عمده جهت تولید واکسن می باشند، مانند: msp 1 و msp2 . کربوهیدرات های متصل به پروتئین های انگل مالاریا بعنوان اپی توپ های آنتی ژنیک مطرح بوده و بوسیله سیستم ایمنی میزبان تشخ...
An Extended Surface Loop on Toxoplasma gondii Apical Membrane Antigen 1 (AMA1) Governs Ligand Binding Selectivity
Apicomplexan parasites are the causative agents of globally prevalent diseases including malaria and toxoplasmosis. These obligate intracellular pathogens have evolved a sophisticated host cell invasion strategy that relies on a parasite-host cell junction anchored by interactions between apical membrane antigens (AMAs) on the parasite surface and rhoptry neck 2 (RON2) proteins discharged from ...
متن کاملIdentification and Characterization of Eimeria tenella Apical Membrane Antigen-1 (AMA1)
Apical membrane antigen-1 (AMA1) is a micronemal protein of apicomplexan parasites that appears to be essential during the invasion of host cells. In this study, a full-length cDNA of AMA1 was identified from Eimeria tenella (Et) using expressed sequence tag and the rapid amplification of cDNA ends technique. EtAMA1 had an open reading frame of 1608 bp encoding a protein of 535 amino acids. Qua...
متن کاملNon-Apical Membrane Antigen 1 (AMA1) IgGs from Malian Children Interfere with Functional Activity of AMA1 IgGs as Judged by Growth Inhibition Assay
BACKGROUND Apical membrane antigen 1 (AMA1) is one of the best-studied blood-stage malaria vaccine candidates. When an AMA1 vaccine was tested in a malaria naïve population, it induced functionally active antibodies judged by Growth Inhibition Assay (GIA). However, the same vaccine failed to induce higher growth-inhibitory activity in adults living in a malaria endemic area. Vaccination did ind...
متن کاملIn vitro studies with recombinant Plasmodium falciparum apical membrane antigen 1 (AMA1): production and activity of an AMA1 vaccine and generation of a multiallelic response.
Apical membrane antigen 1 (AMA1) is regarded as a leading malaria blood-stage vaccine candidate. While the overall structure of AMA1 is conserved in Plasmodium spp., numerous AMA1 allelic variants of P. falciparum have been described. The effect of AMA1 allelic diversity on the ability of a recombinant AMA1 vaccine to protect against human infection by different P. falciparum strains is unknown...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده{@ msg_add @}
نوع سند: پایان نامه
وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه پیام نور - دانشگاه پیام نور استان تهران - دانشکده علوم پایه
کلمات کلیدی
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023